一、核心特性

• 来源：最常用的是酿酒酵母 (Saccharomyces cerevisiae) 来源的 Ulp1 蛋白。

• 类型：高特异性半胱氨酸蛋白酶。

• 识别机制：识别 SUMO 蛋白的三维空间结构，而非特定氨基酸序列。

• 切割位点：精准水解 SUMO 蛋白 C 端 -Gly-Gly- 序列后的肽键。

• 核心优势：无痕切割 (Scarless) —— 切割后不在目标蛋白上残留任何额外氨基酸。

• 反应条件

• 最佳温度：30°C；可在 4-30°C 范围内工作。

• 最佳 pH：8.0；活性范围：pH 6.0-10.0。

• 辅助因子：需 DTT 等还原剂维持活性。

• 耐盐性：可耐受 0-400 mM NaCl。

二、主要功能

1. 体内生理功能 (SENPs)

• SUMO 前体成熟：将无活性的 SUMO 前体切割为成熟形式。

• 去 SUMO 化 (DeSUMOylation)：从底物蛋白上移除已结合的 SUMO，调控细胞周期、转录等。

2. 体外科研应用 (核心用途)

• 重组蛋白纯化：作为SUMO 融合标签系统的关键工具。

• 流程

1. 构建 His-SUMO - 目标蛋白 融合体。

2. 表达并通过 Ni 柱纯化融合蛋白。

3. 用 SUMO 蛋白酶切割，分离 His-SUMO 与目标蛋白。

4. 再次过柱，去除带 His 标签的 SUMO 与蛋白酶，获得高纯、无痕目标蛋白。